Cas12a 蛋白

CRISPR-Cas系统是一种原核适应性免疫系统，用来抵御外来遗传组分对生命体的干扰。1类CRISPR系统（包括I、III和IV型）包含多蛋白效应复合物，而2类CRISPR系统（包括II、V和VI型）具有单一效应蛋白。CRISPR-Cas9属于2类II型CRISPR系统，是目前使用最广泛的基因组编辑工具，由Cas9核酸酶、负责DNA靶向的crRNA及反式激活tracrRNA组成。

CRISPR-Cas12a是另一种用于基因编辑的2类RNA引导的核酸内切酶。Cas12a核酸酶识别5’-TTTV PAM相反链上与crRNA间隔区互补的DNA靶序列，无需使用tracrRNA。识别后于RuvC域和Nuc域处产生交错的DNA双链断裂。与Cas9产生平末端相比，Cas12a产生交错末端可能更有利于以精确方向整合DNA序列等应用。CRISPR-Cas12a基因编辑系统可作为Cas9系统的极大补充，甚至在某些编辑领域中比Cas9系统更具优势。

泓迅科技依托完备的Syno®合成平台及丰富的专业知识和实践经验积累，可提供基于Cas12a 蛋白的一站式解决方案，包括Cas12a(Cpf1) 核酸酶产品及定制化crRNA序列合成服务。经体外系统活性验证，我们的Cas12a核酸酶产品及化学合成的crRNA序列可很好的发挥基因序列的切割作用。

CRISPR-Cas12a编辑系统的优势：

a. CRISPR-Cas12a系统拓展了CRISPR-Cas9系统不可用的编辑位点，且能在序列5’端产生交错切割。这相比CRISPR-Cas9系统，显著增加了细胞选用同源重组修复（HR）方式的概率，提升了基因编辑效率。
b. Cas12a识别富含胸苷的PAM 序列 (YTN)，能够在具有丰富AT基因组的生物体中进行基因组编辑，比CRISPR-Cas9系统更具广泛的序列编辑范围。
c. 只需要crRNA与Cas12a蛋白的简单复合而不需要tracrRNA，且CRISPR-Cas12a的crRNA较短，一般在40-44nt左右，更有利于化学合成。

CRISPR-Cas12a crRNA

目前，将As Cas12a(Cpf1)与crRNA形成的核糖核蛋白（RNP）直接转移到细胞中的方法具有更安全、更快、脱靶效应更低、编辑效率更高等优点。已逐渐成为使用 CRISPR基因编辑技术的一种更有效的方式。

CRISPR-Cas12a与crRNA复合物

CRISPR-Cas12a crRNA 是一个单一的 40-44nt左右的引导 RNA，包含一个 20nt的恒定区和一个 20-24nt的特异性结合区域。我们通常建议使用 21nt的特异性结合区域以获得最佳活性。crRNA识别 TTTV PAM 位点相反链上的21-24 个核苷酸，其中 V 是 A、C 或 G。在进行crRNA序列设计时，设计的crRNA序列中不包含PAM 序列。

服务详情

长度（nt）	订购规格	修饰类型	纯化方式	周期（工作日）	发货形式
40-44nt	1-10 OD	硫代 2′-OMe Blocking	HPLC	7-10	干粉RNA 1管 COA文件

As Cas12a(Cpf1)核酸酶

As Cas12a(Cpf1)核酸酶，来源于Acidaminococcus sp. BV3L6 (A.s.)，由大肠杆菌系统进行表达。C末端带有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS两个核定位信号。同时重组蛋白C末端还带有TEV蛋白酶切位点以及6xHis标签。为获得最佳编辑效果，我们推荐将As Cas12a(Cpf1)核酸酶与Cas12a crRNA 以等摩尔量结合。

As Cas12a(Cpf1)核酸酶产品示意图
产品属性

产品名称	As Cas12a(Cpf1)核酸酶
分子量	157.65KDa
表达系统	Escherichia coli
标签	C-6xHis
纯度	SDS-PAGE，≥95%
浓度	1mg/mL, 100ug蛋白约633 pmol
内毒素	LAL, <0.1EU/ug
储存缓冲液	10 mM Tris, pH8.0, 300 mM NaCl, 0.5 mM TCEP, 50% glycerol
储存条件	-20℃、-80℃保存
发货规格	货号HX-AsCas12a-1: 100ug 货号HX-AsCas12a-2: 0.5mg 货号HX-AsCas12a-3: 1mg
运输条件	蓝冰运输