稳定细胞株构建是指将外源DNA克隆到具有某种抗性或者选择基因的载体上，转染宿主细胞后，利用载体中所含的选择标志进行筛选，得到可稳定表达目的蛋白的细胞株。
泓迅生物提供一系列稳定细胞株构建服务，用于全长抗体及抗体片段、Fc融合蛋白、多种细胞表面受体、胞质和分泌蛋白等重组蛋白/抗体的稳定及规模化生产。
| 服务项目 | 服务详情 | 项目周期 | 交付内容 |
|---|---|---|---|
| 基因合成 | 全基因合成，提供表达载体 | 2-3周 |
√ 稳转细胞株pool √ 项目报告 |
| 小量表达 分析鉴定 | 质粒小量抽提，鉴定，转染CHO细胞，分析表达量，纯化，活性与纯度检测 | 2周 | |
| minipool筛选 (>0.2g/L) |
1. 电转后进行加压筛选； 2. 孔板筛选与扩增实验数据； 3. minipool产量检测实验数据； 4. Top12候选株Fed-Batch（不少于10天）抗体表达30ml； 5. Top3候选与建库； |
7-12周 | |
| 单克隆 筛选 |
1. 有限稀释单克隆筛选； 2. 产量检测； 3. 细胞过程培养实验数据； 4. 单克隆筛选过程记录数据； 5. Top25单克隆Fed-Batch（不少于10天）抗体表达30ml； 6. Top3候选单克隆建库； 7. 单克隆不低于0.5g/L表达水平，三代稳定性； |
6-10周 |
我们通过 PvuI 线性化质粒、电转 CHO 细胞、L-MSX 筛选和高通量ELISA鉴定，成功获得一株表达量达0.8 g/L、活性优良（EC50=0.004）的稳转克隆 2B1。该细胞株经 Fed-batch 培养验证，表现出良好的生长稳定性和表达一致性。
ELISA 阳性克隆筛选：鉴定出80%以上为阳性克隆，其中 2B1 克隆表达量最高。
Fed-batch 培养：通过优化补料策略，最终表达量达到0.8 g/L。
活性验证：稳转株抗体活性（EC50=0.004）与瞬转株（EC50=0.003）相当，表明稳转株具有良好的功能活性。
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