酵母蛋白定制表达服务

原核表达成熟易操作,但是针对真核生物的蛋白,由于涉及到糖基化、折叠伴侣等问题,常会出现错误折叠等情况。而毕赤酵母表达系统作为一种替代方案可以在一定程度上对此进行弥补。泓迅依托强大的合成生物学技术平台,借助于业内领先的密码子优化软件NG®Codon和十年以上的专业的蛋白表达纯化经验,可以有效地节约您的经济成本和时间成本,提供质量领先、服务周到的酵母表达蛋白服务。

酵母蛋白表达服务内容

  1. 表达载体构建(可选)
  2. 首先根据您具体的需求,对蛋白基因进行序列分析。通过业界领先的NG®Codon优化软件,基因的表达量可提高几倍至数十倍。进行基因合成并通过测序验证重组质粒100%序列正确。泓迅可以提供将基因直接克隆进甲醇诱导的pPICZα、pPIC9K或组成型pGAPZα 等商业化的表达载体之中。此外,您也可以选择泓迅特有的酵母特殊表达载体进行表达测试。
    交付内容:冻干质粒1管(4ug/tube)和含有此质粒TOP10甘油菌1管
    交付周期:10-20工作日

  3. 线性化载体和电转化入毕赤酵母
  4. 您也可以直接交付给我们构建好的重组质粒(请确认序列的密码子进行过优化)。对于验证无误的重组质粒,我们选择合适的内切酶对其进行线性化,并采用电转方法转化入毕赤酵母细胞内。筛选阳性克隆,我们从中至少挑取6个克隆进行表达小试。
    交付内容:阳性克隆的筛选报告
    交付周期:5工作作日

  5. 表达条件的优化
  6. 小试的过程我们会优化测试中适合于菌株的培养条件,包括温度、培养基、诱导剂种类、诱导时机和诱导量等因素。我们默认使用SDS-PAGE或Western blot(可选,客户提供验证过的一抗)进行表达效果分析。
    交付内容:小试验证报告一份
    交付周期:5工作日

  7. 目标蛋白放大培养,表达和纯化
  8. 优化到合适表达条件的菌株,我们使用1L或更大的培养规模诱导重组酵母表达。诱导后,进行一步或者多步纯化。SDS-PAGE检测纯度,Western blot(可选,客户提供验证过的一抗)检测正确性。
    交付内容:1-10mg重组蛋白以及纯化报告数据
    交付周期:10-15工作日
    对于有标签蛋白可选择切除服务(可选)。

  9. 蛋白后期加工(可选)
  10. 对于有进一步特殊要求的蛋白,泓迅为您提供多种后期加工选择,包括纯化后蛋白的标签切除、过滤除菌、内毒素祛除、冻干、N端测序等服务。对于您的特殊需求,我们经验丰富的工程师可以为您提供量身定制的后期服务。详情垂询support@synbio-tech.com

酵母蛋白表达订购与咨询

您可以通过以下任意方式下单或咨询,工作时间我们保证在1小时内给您反馈:

  1. Email:下载我们的《泓迅科技蛋白表达纯化订购表》,填写完整后发送到support@synbio-tech.com
  2. 电话订购:您可以直接拨打免费热线4000-973-630转803联系我们经验丰富的工程师
  3. QQ咨询:任何技术问题均可与我们在线互动,泓迅科技官方企业QQ:4000-973-630

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