CRISPR-Cas系统是一种原核适应性免疫系统,用来抵御外来遗传组分对生命体的干扰。1类CRISPR系统(包括I、III和IV型)包含多蛋白效应复合物,而2类CRISPR系统(包括II、V和VI型)具有单一效应蛋白。CRISPR-Cas9属于2类II型CRISPR系统,是目前使用最广泛的基因组编辑工具,由Cas9核酸酶、负责DNA靶向的crRNA及反式激活tracrRNA组成。

CRISPR-Cas12a是另一种用于基因编辑的2类RNA引导的核酸内切酶。Cas12a核酸酶识别5’-TTTV PAM相反链上与crRNA间隔区互补的DNA靶序列,无需使用tracrRNA。识别后于RuvC域和Nuc域处产生交错的DNA双链断裂。与Cas9产生平末端相比,Cas12a产生交错末端可能更有利于以精确方向整合DNA序列等应用。CRISPR-Cas12a基因编辑系统可作为Cas9系统的极大补充,甚至在某些编辑领域中比Cas9系统更具优势。

泓迅科技依托完备的Syno®合成平台及丰富的专业知识和实践经验积累,可提供基于CRISPR-Cas12a系统的一站式解决方案,包括Cas12a(Cpf1) 核酸酶产品及定制化crRNA序列合成服务。经体外系统活性验证,我们的Cas12a核酸酶产品及化学合成的crRNA序列可很好的发挥基因序列的切割作用。

CRISPR-Cas12a编辑系统的优势:

a. CRISPR-Cas12a系统拓展了CRISPR-Cas9系统不可用的编辑位点,且能在序列5’端产生交错切割。这相比CRISPR-Cas9系统,显著增加了细胞选用同源重组修复(HR)方式的概率,提升了基因编辑效率。
b. Cas12a识别富含胸苷的PAM 序列 (YTN),能够在具有丰富AT基因组的生物体中进行基因组编辑,比CRISPR-Cas9系统更具广泛的序列编辑范围。
c. 只需要crRNA与Cas12a蛋白的简单复合而不需要tracrRNA,且CRISPR-Cas12a的crRNA较短,一般在40-44nt左右,更有利于化学合成。

CRISPR-Cas12a crRNA

目前,将As Cas12a(Cpf1)与crRNA形成的核糖核蛋白(RNP)直接转移到细胞中的方法具有更安全、更快、脱靶效应更低、编辑效率更高等优点。已逐渐成为使用 CRISPR基因编辑技术的一种更有效的方式。

CRISPR-Cas12a与crRNA复合物

CRISPR-Cas12a与crRNA复合物

CRISPR-Cas12a crRNA 是一个单一的 40-44nt左右的引导 RNA,包含一个 20nt的恒定区和一个 20-24nt的特异性结合区域。我们通常建议使用 21nt的特异性结合区域以获得最佳活性。crRNA识别 TTTV PAM 位点相反链上的21-24 个核苷酸,其中 V 是 A、C 或 G。在进行crRNA序列设计时,设计的crRNA序列中不包含PAM 序列。

服务详情

长度(nt) 订购规格 修饰类型 纯化方式 周期(工作日) 发货形式
40-44nt 1-10 OD 硫代
2′-OMe
Blocking
HPLC 7-10
  • 干粉RNA 1管
  • COA文件
  •  
    As Cas12a(Cpf1)核酸酶

    As Cas12a(Cpf1)核酸酶,来源于Acidaminococcus sp. BV3L6 (A.s.),由大肠杆菌系统进行表达。C末端带有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS两个核定位信号。同时重组蛋白C末端还带有TEV蛋白酶切位点以及6xHis标签。为获得最佳编辑效果,我们推荐将As Cas12a(Cpf1)核酸酶与Cas12a crRNA 以等摩尔量结合。

    As Cas12a(Cpf1)核酸酶

    As Cas12a(Cpf1)核酸酶产品示意图

    产品属性

    产品名称 As Cas12a(Cpf1)核酸酶
    分子量 157.65KDa
    表达系统 Escherichia coli
    标签 C-6xHis
    纯度 SDS-PAGE,≥95%
    浓度 1mg/mL, 100ug蛋白约633 pmol
    内毒素 LAL, <0.1EU/ug
    储存缓冲液 10 mM Tris, pH8.0, 300 mM NaCl, 0.5 mM TCEP, 50% glycerol
    储存条件 -20℃、-80℃保存
    发货规格 货号HX-AsCas12a-1: 100ug
    货号HX-AsCas12a-2: 0.5mg
    货号HX-AsCas12a-3: 1mg
    运输条件 蓝冰运输

    *注意事项:短期存储可在-20℃保存,长期存储可分装并在-80℃保存,切记反复冻融,保质期1年。

    产品质检图
    Protein Marker&As Cas12a(Cpf1)

    Lane1: Protein Marker
    Lane2: As Cas12a(Cpf1)核酸酶, ~157.65KDa

     
    Cas12a核酸酶活性验证:

    结果分析:目标DNA序列1kb,在Cas12a核酸酶及crRNA作用下切割目标DNA序列,可产生700bp及300bp的小片段。如图所示,在加入3ul及1.5ul Cas12a核酸酶时,都可以表现出高效的DNA序列切割效率。

    免费申请活动详情

    1. 活动时间:2022.09.01-2022.10.31
    2. 本次活动仅限终端客户参与。
    3. 申请免费试用的客户可发送产品名称、个人信息(姓名、单位全称、联系方式)以及邮寄地址至marketing@synbio-tech.com邮箱或与当地销售联系。
    4. 免费试用产品,每个客户仅限申领一次。
    5. 已申请试用的客户填写试用反馈表分享您的实验数据、结果图等,即可享受该产品订购的内部折扣价!
    6. 本活动最终解释权归苏州泓迅生物科技股份有限公司所有。

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