microRNA(miRNA) 是一类长度约19-24nt的非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3′-UTR区部分或完全互补,剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因表达的作用。

miRNA广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中,调控生物体生长发育和疾病发生等过程中相关基因的表达。miRNA的异常表达可能会导致生理状态的异常和疾病的产生,在多种癌症中,其表达水平会发生明显改变,有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外,在许多其他的病变组织和细胞中也检测到了miRNA的异常表达。因此对miRNA的表达的研究具有重要意义。

miRNA长度很短,无法用Oligo (dT)18或6N进行逆转录,探真生物提供茎环法逆转录引物、相应的扩增引物和/或特异性TaqMan探针设计与合成方案,即可对其进行荧光定量。除常用的染料法和TaqMan探针外,还可选择设计合成TaqMan-MGB探针,其探针设计得更短,特异性更高。

miRNA探针 miRNA表达

案例展示

探真生物根据茎环法miRNA表达检测设计与合成方案,分别制备了两种靶标荧光探针:miRNA靶标A荧光探针FAM-oligo-BHQ1、miRNA靶标B荧光探针HEX-oligo-BHQ1,对长度很短、无法用Oligo (dT)18或6N逆转录的miRNA分子进行了ddPCR检测,结果如下。

FAM-oligo-BHQ1探针检测靶标信号:

FAM-oligo-BHQ1探针检测靶标信号

HEX-oligo-BHQ1探针检测靶标信号:

HEX-oligo-BHQ1探针检测靶标信号

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