RNA体外转录（mRNA, lncRNA）
体外转录是常用的RNA合成策略，特别适用于长链RNA的合成。体外转录是指在含有T7,T3或SP6 RNA聚合酶、必要的蛋白质因子、核苷三磷酸等条件的体外无细胞系统中，模仿体内转录过程以DNA为模板转录生成RNA的技术。通过体外转录生成的mRNA 可以产生治疗性蛋白质，已在临床前和临床研究中被评估可用于治疗多种疾病。
泓迅科技凭借自主研发的NGTM Codon密码子优化技术，结合完备的Syno®合成平台，可提供针对sgRNA、lncRNA、mRNA等不同类型的RNA的从模板合成到体外转录的全套服务。经过密码子优化、5’加帽、3’加尾、核苷修饰等一系列序列优化过程，转录后的RNA分子可应用于多种研究场景，如基因编辑、基因功能研究、基因诊断、结构研究、核酸疫苗开发等。
服务优势
- 丰富的RNA类型：sgRNA、lncRNA、mRNA等不同类型的RNA。
- 序列优化：自主研发的NGTM Codon密码子优化技术显著提高mRNA的翻译效率。
- 稳定的修饰：通过添加5’帽子、3’polyA尾巴、核苷修饰等，增强mRNA的稳定性和翻译效率，降低免疫原性。
- 定制化方案：标准的实验程序和经验丰富的专业人员提供量身定制的解决方案。
- 一站式服务：提供从DNA模板合成到RNA体外转录的全套服务。
mRNA体外转录流程
一、 模板合成
模板序列构建于泓迅科技自主开发的pSBT载体，该载体具有长120nt 的Poly(A)尾，在转录过程中可提高mRNA 的稳定性和翻译效率。
二、 RNA体外转录
体外转录以线性DNA序列为模板，利用T7 RNA聚合酶从DNA序列合成RNA。
服务详情
| 服务项目 | 服务详情 | 纯化方式 | 长度 | 周期 | 交付项目 | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 基因合成 | DNA序列合成 载体构建 质粒制备及线性化 |
/ | 不限 | 1周起 | 1管2-5μg冻干质粒 | ||
| RNA合成 | 常规RNA合成 | 无UTR区，无帽子结构，无Poly(A)尾，无核苷修饰 | • 吸附柱纯化 • HPLC纯化 • LiCl纯化 |
<5 kb | 2-3周 | • 液态RNA产品 • COA文件（包含琼脂糖凝胶电泳图或HPLC质检图） |
|
| mRNA合成 | Clean Cap AG+模板转录120 Poly（A）尾巴 | lN1甲基假尿嘧啶（N1-Me-Pseudo UTP） | 4-5周 | ||||
| Clean Cap AG+转录后加尾 | |||||||
| 酶法加帽Cap1+模板转录120 Poly（A）尾巴 | |||||||
| 酶法加帽Cap1+转录后加尾 | |||||||
*其他长度、修饰、特殊序列等，请咨询：support@synbio-tech.com
案例展示: EGFP mRNA
泓迅科技将β珠蛋白的UTR区及绿色荧光蛋白（EGFP）编码区构建于公司自主开发的pSBT载体，并通过体外转录及Cap1加帽类似物生成带有Cap1帽子及120nt ploy(A)尾巴的EGFP mRNA序列，琼脂糖凝胶电泳检测，如图1，HPLC 纯度检测，如图2。该序列经蛋白表达检测显示出良好的表达效率（如图3）。
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