RNA体外转录(mRNA, lncRNA)

体外转录是常用的RNA合成策略,特别适用于长链RNA的合成。体外转录是指在含有T7,T3或SP6 RNA聚合酶、必要的蛋白质因子、核苷三磷酸等条件的体外无细胞系统中,模仿体内转录过程以DNA为模板转录生成RNA的技术。通过体外转录生成的mRNA 可以产生治疗性蛋白质,已在临床前和临床研究中被评估可用于治疗多种疾病。
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泓迅科技凭借自主研发的NGTM Codon密码子优化技术,结合完备的Syno®合成平台,可提供针对sgRNA、lncRNA、mRNA等不同类型的RNA的从模板合成到体外转录的全套服务。经过密码子优化、5’加帽、3’加尾、核苷修饰等一系列序列优化过程,转录后的RNA分子可应用于多种研究场景,如基因编辑、基因功能研究、基因诊断、结构研究、核酸疫苗开发等。

服务优势

  1. 丰富的RNA类型:sgRNA、lncRNA、mRNA等不同类型的RNA。
  2. 序列优化:自主研发的NGTM Codon密码子优化技术显著提高mRNA的翻译效率。
  3. 稳定的修饰:通过添加5’帽子、3’polyA尾巴、核苷修饰等,增强mRNA的稳定性和翻译效率,降低免疫原性。
  4. 定制化方案:标准的实验程序和经验丰富的专业人员提供量身定制的解决方案。
  5. 一站式服务:提供从DNA模板合成到RNA体外转录的全套服务。

mRNA体外转录流程

一、 模板合成
模板序列构建于泓迅科技自主开发的pSBT载体,该载体具有长120nt 的Poly(A)尾,在转录过程中可提高mRNA 的稳定性和翻译效率。
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二、 RNA体外转录
体外转录以线性DNA序列为模板,利用T7 RNA聚合酶从DNA序列合成RNA。
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服务详情

服务项目 服务详情 纯化方式 长度 周期 交付项目
基因合成 DNA序列合成
载体构建
质粒制备及线性化
/ 不限 1周起 1管2-5μg冻干质粒
RNA合成 常规RNA合成 无UTR区,无帽子结构,无Poly(A)尾,无核苷修饰 • 吸附柱纯化
• HPLC纯化
• LiCl纯化
<5 kb 2-3周 • 液态RNA产品
• COA文件(包含琼脂糖凝胶电泳图或HPLC质检图)
mRNA合成 Clean Cap AG+模板转录120 Poly(A)尾巴 lN1甲基假尿嘧啶(N1-Me-Pseudo UTP) 4-5周
Clean Cap AG+转录后加尾
酶法加帽Cap1+模板转录120 Poly(A)尾巴
酶法加帽Cap1+转录后加尾

*其他长度、修饰、特殊序列等,请咨询:support@synbio-tech.com

案例展示: EGFP mRNA

泓迅科技将β珠蛋白的UTR区及绿色荧光蛋白(EGFP)编码区构建于公司自主开发的pSBT载体,并通过体外转录及Cap1加帽类似物生成带有Cap1帽子及120nt ploy(A)尾巴的EGFP mRNA序列,琼脂糖凝胶电泳检测,如图1,HPLC 纯度检测,如图2。该序列经蛋白表达检测显示出良好的表达效率(如图3)。
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