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PCR克隆与亚克隆

分子克隆技术是20世纪70年代发展起来的一项技术,目前已经成为了分子生物学中一项广泛应用的技术,它的出现让人们对于了解和改造基因提供了更多的可能,并对农业、工业和医学产生了革命性的影响,同时也为解决世界面临的能源、食品和环保危机提供新的解决方案。

PCR克隆:

PCR克隆技术类似于DNA天然的复制过程,由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成,根据已知序列设计引物可以从基因组中获得目的片段。通过PCR克隆技术得到目的基因是DNA克隆的重要过程之一。

亚克隆:

亚克隆技术是指初始克隆中的外源DNA片段较大,还有很多目的基因以外的片段,为了对目的DNA进行进一步的分析或者重组改造等,会对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,这个过程叫做亚克隆。亚克隆的基本过程包括目的片段的筛选、克隆载体的制备、连接产物转入细胞及重组子的筛选。

无论是PCR克隆技术还是亚克隆技术,都是使用重组技术在体外将已得到的目的基因插入到载体中,形成重组的载体,再通过转导/转化的方法进入到宿主体内,从而在宿主体内实现基因的复制与扩增,最后通过筛选的方法获得存有目的基因的克隆载体,实现了分子水平的DNA片段的纯化与扩增。

泓迅科技拥有专利的Syno®2.0基因合成平台,可以提供从基因合成、载体构建到PCR克隆、亚克隆的一站式服务,根据客户提供的模板克隆和序列,设计扩增引物将目标区段PCR产物克隆到新的载体特定位点上,并进行测序验证,为客户提供准确、快速的亚克隆服务。